Архив рубрики «Антибиотики»

В двух культурах эпителиальных клеток человека зависимость гибели клеток от времени действия оксимочевины существенно отличалась от этой зависимости в культуре клеток мыши и хомячка. В культуре клеток HeLa при добавлении 1 ммоля оксимочевины на 1 л среды выжившая фракция в течение 6 ч уменьшалась лишь до 8590, не изменялась в течение последующих 10 ч и после 16 ч снижалась экспоненциально (Kim е. a., 1968b). В этой культуре зависимость гибели клеток от времени действия оксимочевины и арабинозилцитозина совпадала. Очевидно, тип зависимости гибели клеток от времени действия различных, ингибиторов синтеза ДНК определялся свойствами клеток. В культуре клеток НЕр2 действие оксимочевины в концентрации 2,5 ммоль/л в течение 414 ч не вызывало гибели клеток. Через 27 ч выжившая фракция составляла 40, через 44 ч 9 (Coyle, Strauss, 1970).

Существенный интерес представляет изучение гибели клеток при действии оксимочевины, специфического ингибитора синтеза ДНК. Baccheti и Whitmore (1969а) изучили гибель фибробластов L в зависимости от времени действия оксимочевины в различных концентрациях. В концентрации 0,1 ммоль препарат был неэффективен, в концентрации 0,5 ммоль вызывал небольшое начальное уменьшение выжившей фракции с последующим плато и постепенным уменьшением выжившей фракции до 25 через 24 ч. Действие оксимочевины в концентрации 110 ммоль характеризовалось выраженным начальным падением выжившей фракции, отсутствием ее изменения через 412 ч и экспоненциальным уменьшением числа жизнеспособных клеток через 1224 ч. В стационарной культуре начальная гибель 38 клеток была менее выражена и через 428 ч величина выжившей фракции не изменялась. В культуре клеток китайского хомячка при действии 1 ммоль/л оксимочевины наблюдалась быстрая гибель 60 клеток (Sinclair, 1965). В обеих культурах число клеток, погибших после кратковременного воздействия оксимочевины, соответствовало величине индекса метки.

В культуре фибробластов L при действии винбластина потеря жизнеспособности происходила параллельно накоплению клеток в метафазе в течение 20 ч при концентрации 0,2 мкг/мл (Bruchovski е. а., 1965). Через 20 ч выжившая фракция составляла 510. Кратковременное воздействие винбластина на асинхронную культуру не вызывало гибели опухолевых клеток. Таким образом, в культуре клеток, так же как in vivo в лимфоме, винбластин вызывал гибель опухолевых клеток, находящихся в митозе, и летальный эффект определялся временем действия препарата и скоростью вступления клеток в митоз.

Блеомицин антибиотик, недавно открытый и довольно широко используемый в химиотерапии опухолей, относитель 37 но слабо действует на жизнеспособность клеток в культуре. Для культуры клеток хомячка кривая дозаэффект при действии блеомицина в течение 30 мин была двухфазна (Вагraneo, Humphrey, 1971b). Начальная часть кривой имела D0 12 мкг/мл и отражала гибель 50 чувствительных клеток. Остальные 50 клеток были в 10 раз менее чувствительны и поэтому после их инкубации при высокой концентрации антибиотика (100 мкг/мл) выжившая фракция снижалась только до 25. Увеличение времени воздействия до 2 ч лишь незначительно усиливало эффект. Для культуры клеток лимфомы человека кривая дозаэффект также была двухфазна: 82 ‘Клеток характеризовались D017 мкг/мл, а остальные клетки были значительно более резистентны (D0140 мкг/мл) (Drewinko е. а., 1972). При действии блеомицина в концентрации 200 мкг/мл в течение 1 ч выжившая фракция уменьшалась только до 7. При увеличении времени воздействия антибиотика выжившая фракция быстро уменьшалась и через 35 ч составляла 0,06. Эти данные приводят к весьма важному заключению о действии блеомицина. Для получения значительной гибели клеток препарат должен действовать в течение периода, приблизительно разного длительности цикла. Только в этом случае происходит гибель большей части клеток в резистентной субпопуляции.

Адриамиции в концентрации 10 нг/мл не вызывал гибели клеток HeLa (S. Kim, J. Kim, 1972). При увеличении концентрации и времени действия препарата гибель клеток усиливалась. После инкубации в течение 3 ч в среде, содержащей.100 нг антибиотика в 1 мл, выжившая фракция составляла 5, что указывает на чувствительность клеток HeLa к адриамицину. Клетки лимфомы человека в культуре были высокочувствительны к адриамицину (Drewinko, Gottlieb, 1973). При действии препарата в течение 1 ч D0 составляло. всего 150 нг/мл, а при воздействии в течение 12 ч даже низкая концентрация препарата (100 иг/мл) снижала выжившую фракцию по 0,001. Гибель клеток нарастала экспоненциально с увеличением дозы и времени воздействия. Особенно резким было уменьшение выжившей фракции при увеличении времени действия. Так, при концентрации 100 нг/мл выжившая фракция через 12 ч была в 10 000 раз меньше, чем выжившая фракция через 1 ч. Очевидно, резкое усиление цитотоксического действия при увеличении времени воздействия характерно для антибиотиков, связывающих с ДНК. Кривая дозаэффект при действии адриамицина на клетки лимфомы в культуре характеризовалась отсутствием плеча. Интересно, что при действии адриамицина на клетки лимфомы мышей in vivo на кривой дозаэффект имеется значительное плечо (Razek е. а., 1972). Как считают Drewinko и Gottlieb (1973), наличие неэффективных доз in vivo отражает фармакологические аспекты взаимодействия препарата в организме. Очевидно, абсорбция, связывание и выделение препарата приводят к тому, что после введения животным малых доз препарат не оказывает действия на опухолевые клетки.