Архив рубрики «Антибиотики»

Адриамидин оказывал значительное цитотоксическое действие на культуру клеток хомячка (Ваггдпсо е. а., 1973). Кривая дозаэффект была двухфазна и 99 клеток характеризовались высокой чувствительностью (D0200 нг/мл). Остальная часть популяции была в 50 раз более резистентна. Поэтому действие антибиотика даже в очень высокой концентрации (25 мкг/мл) снижало выжившую фракцию до 0,01. Двухфазная кривая доза эффект, наблюдаемая при действии адриамицина на клетки хомячка, в общем схожа с такой кривой при действии актиномицина D на фибробласты L (Baccheti, Whitrnore, 1969b), но в случае актиномицина D различие в чувствительности двух субпопуляций значительно меньше и резистентная субпопуляции больше.

Дауномицин и адриамицин, два близких по структуре антибиотика, вызывают значительную гибель клеток в культуре. В культуре HeLa выжившая фракция уменьшалась экспоненциально в зависимости от времени инкубации с дауноми. цином (Kim е. а., 1968а). Низкие концентрации антибиотика (10 нг/мл) не вызывали гибели клеток. Таким образом, действие дауномицина, как и актиномицина D, характеризовалось наличием пороговой концентрации. Обращает внимание, что при действии обоих антибиотиков были эффективны даже кратковременные воздействия, что отличает их от различных ингибиторов синтеза ДНК, для которых характерно на 36 личие латентного периода. Клетки HeLa были значительно более чувствительны к летальному действию антибиотиков, чем к такому же действию антиметаболитов.

Thatcher и Walker (1969) показали, что культура эмбриональных клеток хомячка в стационарной фазе незначительно отличается по чувствительности к актиномицину D от активно растущей культуры. Отличие этих данных от результатов Baccheti и Whitmore (1969b), полученных на культуре фибробластов L, очевидно, объясняется тем, что культуры L и клеток хомячка в стационарной фазе накапливались в разных фазах в фазах Gi и G2 соответственно.
Существенный интерес представляет работа Sawicki и Godman (1971), в которой изучалась острая дегенерация клеток при действии актиномицина D. При эт. ом было установлено, что чувствительность различных культур резко различается. Непрерывное воздействие актиномицина D в концентрации 0,5 мкг/мл давало максимальный эффект лизис 7580 клеток HeLa в течение 12 ч. Пикнотические клетки появлялись через 2 ч. При более низких дозах препарата гибель клеток наступала через 1236 ч. При воздействии в течение 1 ч максимальная гибель клеток наблюдалась при дозе 2,5 мкг/мл. Дауномицин. и ногаломицин давали такой же эффект, как и актиномицин D. В культурах фибробластов L, W138 и почек обезьян ранняя дегенерация клеток при воздействии актиномицина D не наблюдалась и клетки начинали погибать после 1218 ч инкубации. Таким образом, по признаку ранней гибели клетки HeLa значительно более чувствительны к актиномицину D, чем фибробласты L, в то время как величина выжившей фракции не указывает на резкие -различия в чувствительности этих двух линий.

В культуре фибробластов хомячка при воздействии актиномицина iD в течение 30 мин кривая дозаэффект характеризовалась незначительной гибелью клеток до концентрации 1 мкг/мл и последующим экспоненциальным уменьшением выжившей фракции (Elkind е. а., 1969). Следовательно, эта кривая отличается от зависимости, характерной для фибробластов L, имевших повышенную чувствительность к низким 3 35 дозам. Возможно, что отличие является результатом различий в проницаемости для препарата двух типов клеток.
Djordjevic и Kim (1968) изучили гибель клеток в культуре HeLa при действии актиномицина D в течение 6 ч. Препарат в концентрации 10 нг/мл не влиял на величину выжившей фракции, при 50100 нг/мл происходило ее незначительное снижение, а концентрация 300 иг/мл снижала выжившую фракцию до 1. Следовательно, клетки HeLa, как и фибробласты L, оказались нечувствительны к актиномицину D в низких дозах.

В ряде работ детально изучалась гибель клеток при действии актиномицина D. В культуре фибробластов L при действии актиномицина D в течение 1 ч кривая дозаэффект была двухфазна (Baccheti, Whitmore, 1969b). Начальная фаза кривой характеризовалась Di0 230 нг/мл и уменьшением выжившей фракции до 5. Выжившие 5 клеток были относительно резистентны и имели Di0l,7 мкг/мл. Зависимость гибели клеток от времени действия актиномицина D существенно отличалась для разных концентраций препарата. При добавлении 50 нг и менее актиномицина D на 1 мл среды в течение 48 ч гибели клеток не происходило, затем выжившая фракция постепенно уменьшалась и через сутки составила 1. При концентрации актиномицина D 100 нг/мл и выше кривые ‘были двухфазны: происходила быстрая начальная гибель 99 клеток и более медленная их гибель в последующем. При больших дозах препарата уже через 510 мин погибало 2040 клеток. Эти данные были получены на культуре в логарифмической фазе роста. По мере увеличения возраста культуры и перехода в стационарную фазу при сохранении двухфазного характера кривых дозаэффект происходили следующие изменения. Резистентность обеих субпопуляций увеличивалась, что проявлялось в уменьшении наклона кривых, а соотношение между субпопуляциями сдвигалось в сторону резистентной субпопуляции; чувствительность активно растущей и стационарных культур к актиномицину D резко различалась и после действия препарата в концентрации 4 мкг/мл в течение 1 ч выжившая фракция составляла 0,05 и 10 соответственно.