Архив рубрики «Выжившая фракция»

Зависимость действия эмбихина от фазы цикла была также изучена в работе Mauro и MadocJones (1970) в условиях, которые существенно отличались от условий опытов в работе Sakamoto, Elkind (1969). Mauro, MadocJones (1970) использовали другую клеточную линию (HeLa), другой метод синхронизации (селекция митозов) и концентрацию 0,5 мкг/мл, при которой препарат был малоэффективен в клетках HeLa. Выжившая фракция в наиболее чувствительной фазе цикла в работе Mauro и MadocJones (1970) была в 100 раз больше, чем в работе Sakamoto и Elkind (1969). Несмотря на такие различия в условиях опытов, результаты в обеих работах полностью совпали: наиболее чувствительными были клетки на границе фаз Gi и S и наименее чувствительными клетки в поздней фазе S. Степень различия между максимальной и минимальной чувствительностью была значительно большей в работе Sakamoto и Elkind (1969), очевидно, вследствие того, что в этой работе использовалась более высокая доза эмбихина.

Следовательно, характер зависимости выжившей фракции от дозы в асинхронной популяции в основном определяется такой зависимостью в резистентной субпопуляции. Чем большей является доля клеток в резистентной субпопуляции и чем больше различие в величине выжившей фракции между резистентной и чувствительной субпопуляцией, тем более справедливо это положение.

Sakamoto и Elkind (1966) изучали действие эмбихина на фибробласты хомячка, синхронизированные оксимочевиной. Интересной особенностью этой работы является определение зависимости выжившей фракции от дозы в резистентной субпопуляции синхронизированной культуры. Доза 1 мкг/мл, выбранная для изучения зависимости выжившей фракции от фазы цикла, снижала в асинхронной культуре выжившую фракцию до 1. В наиболее чувствительной субпопуляции эта доза снижала выжившую фракцию до 0,1. Зависимость выжившей фракции от дозы в асинхронной культуре и в резистентной субпопуляции (клетки в поздней фазе S) существенно не различалась. В обоих случаях кривая доза эффект имела плечо, кото 60 рое было лишь несколько больше для резистентной субпопуляции, и одинаковый наклон экспоненциальной части кривой.

Исследование зависимости выжившей фракции от фазы цикла привело к фундаментальному выводу: все препараты действуют поразному на клетки в различных фазах цикла. Нет ни одного примера равномерного летального действия на всем протяжении клеточного цикла.
Дифференциальная чувствительность разных фаз клеточного цикла к химиотерапевтическим препаратам имеет значение при исследовании механизма действия препаратов и при разработке оптимальных схем лечения.
Остановимся на зависимости гибели клеток от фазы цикла для химиотерапевтических препаратов разных классов.

Основным методом изучения гибели опухолевых клеток в разных фазах цикла является определение выжившей фракции при действии препарата на синхронизированную клеточную популяцию. Удовлетворительные методы синхронизации разработаны в настоящее время только для культуры клеток и. поэтому практически все ‘исследования в этом направлении ‘Проведены in vitro на стабильных клеточных линиях. Основной методический прием при определении зависимости выжившей фракции от фазы клеточного цикла заключается в воздействии препарата в различные сроки после окончания действия синхронизирующего агента и в сопоставлении величины выжившей фракции с фазой цикла в синхронизированной популяции во время начала действия препарата. Таким путем была получена информация о действии многих препаратов.