Архив рубрики «Использование»

С учетом этих допущений было получено уравнение, показывающее зависимость выжившей фракции лейкозных клеток (F) от других параметров:
Tl/2, D ~т1п «пГ F 2 2 с где Тх/2полупериод существования винбластина в сыворотке, Тс время генерации; D доза препарата; D критическая доза.
Если DDk, то F0. Экспериментально были получены следующие результаты: Dk 1 мкг; Тс 11,2 ч; Ti/3 37г ч. Отсюда Тс/Тх/2 3,1 и при введении 1 мкг231, т. е. 8 мкг, F должна упасть до 0. Значение Dk 1 мкг было взято на основании того, что после введения этой дозы в сыворотке мыши достигалась концентрация винбластина, критическая при его действии в культуре клеток.

Модель гибели опухолевых клеток при действии винбластина основана на шести допущениях: 1) число опухолевых клеток увеличивается экспоненциально со временем. Действительно, после перевивки лейкозных клеток число КОЕ увеличивается экспоненциально в течение 7 дней от 5 до 105 на бедро; 2) все клетки, находящиеся в цикле, имеют одинаковое время генерации; 3) пролиферирующие клетки in vivoне мигрируют; 4) активность винбластина во внеклеточной среде пропорциональна дозе и уменьшается экспоненциально со временем; 5) только клетки в митозе погибают под действием винбластина; 6) при концентрации винбластина ниже критической выживает 100 клеток, выше критической 0 .

В этом заключается огромное методологическое значение работ Bruce с соавторами. Однако следует иметь в виду, что эти работы выполнены на одном штамме опухолей перевиваемом лимфатическом лейкозе мышей AKR, обладающем исключительно высокой чувствительностью:к большинству химиотерапевтических препаратов, не типичной для многих опухолей.
Так, например, после введения 1 мг циклофосфамида выжившая фракция в лейкозе AKR была в 1000 раз меньше, чем в перевиваемых раковых опухолях.
Наиболее детально Bruce с соавторами изучили действие винбластина (Valeriote е. а., 1966а). На 4й день после перевивки 1 млн. клеток лимфомы мышам однократно вводили разные дозы винбластина и через 24 ч определяли выжившую фракцию. Выжившая фракция лейкозных клеток костного мозга после введения 0,2 мг винбластина падала до 0,1 и существенно не уменьшалась при увеличении дозы до 1 мг. Таким образом, кривая доза эффект имела два участка: экспоненциальное уменьшение выжившей фракции и плато. В селезенке выжившая фракция уменьшалась после введения 0,2 мг до 0,0017, т. е. в значительно большей степени, чем в костном мозге, и при увеличении дозы до 1 мг уменьшалась еще в 10 раз. Кривая доза эффект для лейкозных клеток в селезенке имела два участка экспоненциального и медленного падения выжившей фракции. ‘Следовательно, для винбластина характерно уменьшение действия при нарастании дозы (эффект насыщения). Результаты изучения зависимости выжившей фракции от дозы и времени действия винбластина были сопоставлены с результатами, предсказанными математической моделью выживаемости клеток. Модель Valeriote с соавторами (1966) представляет общий интерес для понимания закономерностей гибели клеток, так как при этом учитывается не только клеточная кинетика опухоли, но и фармакокинетика препарата.

Meeker, 1965; Valeriote e. a., 1966 a, b, 1968; Bruce e. a., 1966, 1967, 1969).
В этих работах впервые была изучена зависимость величины выжившей фракции от дозы для большого числа препаратов разных классов. Bruce с соавторами четко показали, что зависимость выжившей фракции от дозы характеризует роль интенсивности пролиферации для действия препарата. Эти работы стимулировали ряд исследований в различных лабораториях, что поставило изучение клеточных механизмов химиотерапии опухолей на высокий уровень, дало возможность классифицировать химиотерапевтические препараты, количественно охарактеризовать избирательность их действия на опухолевые клетки и осуществить рациональное комбинирование препаратов.

Косвенные методы лишены этих недостатков, поскольку опухолевые клетки остаются in situ и выжившая фракция определяется на основании их размножения. Кроме того, косвенные методы менее трудоемки и не требуют большого числа животных. Однако возможность задержки пролиферации выживших клеток и ‘изменения скорости их пролиферации вызывает сомнение в точности определения выжившей фракции косвенными методами. В большинстве случаев действие этих факторов не было исключено. Все же приведенные выше данные о совпадении результатов, получаемых прямыми и косвенными методами, говорят в пользу достоверности результатов, получаемых косвенными методами. Следует учитывать, что косвенные методы приложимы только в случае линейной зависимости между изучаемым параметром и логарифмом числа введенных клеток в контроле. В сущности косвенные методы определения выжившей фракции дают возможность по калибровочной кривой интерпретировать обычные показатели химиотерапевтических опытов в виде параметров, описывающих гибель клеток. Следует подчеркнуть, что прямые методы определения выжившей фракции не могут быть заменены косвенными, особенно при необходимости детальной количественной информации.