Архив рубрики «Антибиотики»

Была исследована также зависимость выжившей фракции от величины повторной дозы при введении ее через 3, 6 или 12 ч после введения 25 мг/кг. Плечо на кривой не обнаруживалось при интервале 3 ч, появлялось через 6 ч и увеличивалось через 12 ч. Эти данные соответствовали результатам, полученным при фракционировании доз: отсутствию репарации за 3 ч и эффективности вследствие этого малых доз, а также способности клеток вновь накапливать сублетальные повреждения через 612 ч. Таким образом, выживание клеток при повторных введениях препарата объяснялось действием двух факторов: репарации сублетальных повреждений и частичной синхронизацией выживших клеток в резистентной фазе цикла. Авторы указывают на другие объяснения наличия плеча на кривой дозаэффект, кроме сублетального повреждения: это может проявиться изза ограничения проницаемости клеточной мембраны или изза деградации активной формы препарата со скоростью, близкой к скорости активации, в результате чего при введении низких доз не достигается токсического уровня препарата. Против этих объяснений говорит отсутствие плеча на кривой дозаэффект при двукратном введении циклофосфамида с интервалом Зч.

Гибель клеток в опухолях in vivo Детальные исследования гибели клеток в опухолях in vivo, особенно в солидных опухолях, относительно немногочисленны, несмотря на их огромную важность для понимания механизма действия химиотерапевтических препаратов. Поэтому эти работы будут изложены весьма подробно.
В ряде работ была детально изучена гибель клеток при действии циклофосфамида. Мышам с асцитной лейкемией L1210 циклофосфамид вводили подкожно через 24 ч после перевивки и выжившую фракцию определяли методом экстрополяции по увеличению числа клеток в брюшной полости (De Wys, Kight, 1969). На кривой дозаэффект наблюдалось плечо в результате того, что введение 612,5 мг/кг давало слабый эффект. Экспоненциальный участок характеризовался наличием начального компонента с D0 10 мг/кг,. перегибом между дозами 57 и 75 мг/кг и последующим участком с меньшим наклоном (D016 мг/кг). Такой перегиб указывает на наличие субпопуляций с различной чувствительностью. Начальный участок кривой характеризует поведениечувствительной субпопуляции, заключительный участок резистентной. Поскольку популяция асинхронна, негомогенность чувствительности можно объяснить ее колебанием в цикле. Плечо кривой дозаэффект указывало на наличие сублетальных повреждений, которые были детально изучены методом фракционирования доз. После однократного введе 40 ния 37,5 мг/кг и этой же суммарной дозы, введенной в два приема с интервалом 3 ч (25 и 12,5 мг/кг), выжившая фракция была одинакова. При интервале 6 ч выжившая фракция была в 2 раза больше при введении дробной дозы; при увеличении интервала различие еще не увеличивалось. Это показывает, что в течение 3 ч сублетальное повреждение остается фиксированным и через 6 ч и позже происходит его репарация. Если вводили две дозы по 25 мг/кг, то при интервале 6 ч выжившая фракция была такой же, как и после однократного введения и лишь при увеличении интервала происходило восстановление. Таким образом, чем больше была вторая доза, тем позже определялось начало репарации. Эти данные позволили рассчитать степень репарации. Выжившая фракция после введения 25 мг/кг составляет 21. Если выжившие клетки полностью восстанавливают сублетальное повреждение, то после второй такой же дозы выжившая фракция должна составлять 0,21X0,210,044 или 4,4. При полном отсутствии репарации выжившая фракция должна быть 1,7, как и после введения 50 мг/кг. Фактически выжившая фракция при интервале 12 ч составляла 7, что указывает на полную репарацию и, кроме того, на действие дополнительного фактора, повышающего резистентность выживших клеток. Авторы считают, что таким фактором является переход выживших клеток по циклу. Во время введения препарата выжившие клетки находятся в фазе цикла, наиболее резистентной к циклофосфамиду, и через 12 ч при tcll ч вновь вступают в эту фазу.

Исследование гибели клеток в культуре позволяет, с одной стороны, охарактеризовать действие препарата, а с другой свойства культуры. Эти характеристики проявляются, в кривых, описывающих зависимость выжившей фракции от дозы препарата и времени его действия. Анализ этих кривых позволяет выделить четыре группы препаратов: 1) для антиметаболитов и других соединений, действующих на синтез ДНК, характерны наличие насыщения в кривой дозаэффект, неэффективность кратковременных воздействий и замедление гибели клеток при длительном воздействии в результате выживания клеток с длительным циклом; 2) для воздействий, вызывающих гибель клеток в короткий период цикла, характерно нарастание гибели клеток со временем по мере их вступления в чувствительную фазу; 3) действие алкилирующих соединений характеризуется экспоненциальной кривой дозаэффект и в некоторых случаях наличием плеча на этой кривой; 4) при действии антибиотиков, связывающихся с ДНК, гибель клеток быстро нарастает по мере увеличения времени воздействия и кривая дозаэффект обычно двухфазна вследствие наличия чувствительной и резистентной субпопуляций.

Представляют интерес данные о гибели фибробластов хомячка при действии гетерологичных антител и комплемента (Shipley, 1972). Клетки инкубировали в течение 1 ч при избытке комплемента. Кривая дозаэффект имела плечо и участок экспоненциального уменьшения выжившей фракции с D0 1: 16 200 разведения антисыворотки, что указывает на значительную цитотоксичность гетерологичных антител в культуре.

В последнее время соединения платины привлекают значительное внимание как противоопухолевые средства. В связи с этим представляют интерес данные о гибели клеток при действии этих соединений. В культуре клеток лимфомы человека диамминдихлорплатина при воздействии в течение 1 ч вызывала гибель клеток, которая увеличивалась экспоненциально с возрастанием дозы (Drewinko е. a., 1973b). Увеличение времени воздействия резко усиливало цитотоксическое действие. Так, при действии препарата в концентрации 5 мкг/мл выжившая фракция составляла 50 через 1 ч и 0,1 через 8 ч. В сыворотке человека после введения нетоксичных доз диамминдихлорплатины концентрация препарата не превышает 25 мкг/мл, но препарат выделяется медленно и ‘поэтому его действие на культуру клеток в течение длительного времени в низкой концентрации соответствует тому, что ‘происходит при лечении опухолей in vivo.