29.04.2011

Зависимость выжившей фракции от дозы при действии антибиотиков антрациклинового ряда на перевиваемую лимфому изучали Razek с соавторами (1972). Кривые дозаэффект для дауномицина и адриамицина характеризовались наличием плеча, особенно выраженного в случае дауномицина, и последующим экспоненциальным уменьшением выжившей фракции. Наличие значительной пороговой дозы и резкое возрастание гибели клеток по мере увеличения дозы выше пороговой приводили к тому, что введение 0,3 мг дауномицина снижало выжившую фракцию до 20, а при увеличении дозы в 2 раза выжившая фракция составляла всего 0,01. Максимальные дозы антибиотиков снижали выжившую фракцию до 0,0010,0001. Однако эти антибиотики следует считать малоэффективными против перевиваемой лимфомы, поскольку после их введения в дозе LDi0 выжившая фракция превышала 10. Интерес представляет определение выжившей фракции в различные сроки после однократного введения препаратов в дозе, снижавшей выжившую фракцию через 24 ч до 0,010,001 После введения обоих антибиотиков выжившая фракция снижалась до 50 через 30 мин, уменьшалась экспоненциально в течение последующих 2030 ч, а затем начинала увеличиваться, очевидно, в результате размножения выживших клеток. Аналогичные закономерности наблюдались также при взятии клеток для титрования в различное время после введения 10 мкг актиномицина D мышам с лимфомой (Vietti, Valeriote, 1971). Выжившая фракция снижалась до 50 через 30 мин, не изменялась следующие 4 ч и снижалась экспоненциально в последующие 2030 ч до 0,001. Это указывало на то, что актиномицин D действовал на клетки длительное время. Для доказательства этого положения были поставлены следующие опыты. Мышам ввели актиномицин D и через различные сроки после этого перевили клетки лимфомы. Выжившую фракцию в опухоли определяли по длительности жизни мышей. Максимальная гибель клеток наблюдалась при введении их сразу же после введения препарата. С увеличением интервала выжившая фракция возрастала экспоненциально в течение 16 ч и более медленно в течение следующих 8 ч. Следовательно, актиномицин D в концентрации, летальной для опухолевых клеток, сохраняется в организме 24 ч. Эти опыты отвергают другое объяснение снижения выжившей фракции со временем, а именно сохранение препарата внутри опухолевых клеток. Таким образом, три антибиотика (актиномицин D, дауномицин, адриамицин), связывающиеся с ДНК, характеризовались постепенным уменьшением выжившей фракции после однократного введения препарата. Это отличает антибиотики от алкилирующих соединений, которые сразу снижают выжившую фракцию до минимума. В последующем 48 Valeriote с соавторами (1973) изучили гибель клеток в перевиваемой лимфоме после введения разных доз актиномицина D. Через 30 мин после введения 10 мкг и менее выжившая фракция снижалась до 40, очевидно, в результате гибели клеток в фазе S. При наименьшей дозе препарата последующего снижения выжившей фракции не происходило. При средних дозах препарата через 25 ч после введения вновь начиналась гибель клеток, которая происходила в течение 36 ч. Очевидно, актиномицин D временно блокировал переход клеток в чувствительную фазу. Введение 20 мкг актиномицина D, дозы значительно превышающей LDi0, вызывало экспоненциальное уменьшение выжившей фракции в течение 15 ч, и в последующем живые опухолевые клетки не обнаруживались. Авторы считают, что актиномицин D в высокой дозе летален для клеток во всех фазах цикла, а в средних и низких дозах избирательно токсичен для клеток в фазе S.

Другая серия работ, имеющих общее значение для интерпретации данных о гибели опухолевых клеток, была проведена Wilkoff с соавторами (1967, 1970, 1972). В этих работах препараты действовали на суспензионную экспоненциально растущую культуру клеток лейкемии L1210 и жизнеспособность опухолевых клеток определяли в опытах на мышах. Наибольшее внимание Wilkoff с соавторами уделили выяснению зависимости выжившей фракции от времени действия препаратов. Основная доза препаратов соответствовала концентрации в организме мыши после введения препарата в дозе LDio. Эту дозу рассчитывали следующим образом. Вода составляет 75 массы мыши и при допущении равномерного распределения препарата в организме его концентрация во внеклеточной ореде (С) составляет: С м>кг/мл l,3xLDi0 мг/кг массы.

Основные закономерности противоопухолевого эффекта анализируются автором с позиций клеточной кинетики. Широкое использование количественного подхода при анализе клеточных механизмов химиотерапии опухолей ставит монографию на высокий современный уровень.
Несомненно, одной из Наиболее важных и в то же время трудных проблем является практическое применение результатов изучения клеточных механизмов химиотерапии опухолей. Подобное применение должно основываться на знании кинетики пролиферации нормальных и опухолевых клеток до и после введения препаратов. В связи с этим существенный 3 интерес представляют данные, изложенные в заключительной главе монографии, об использовании клеточной кинетики для разработки оптимальных схем лечения опухолей. Подобная разработка проводится в настоящее время в эксперименте в следующих направлениях: определение схем введения отдельных препаратов, поиск путей синхронизации опухолевых клеток, установление оптимальных комбинаций препаратов и путей усиления противоопухолевого действия. Некоторые из этих разработок дают обнадеживающие результаты в клинике.

В культуре фибробластов хомячка при воздействии актиномицина iD в течение 30 мин кривая дозаэффект характеризовалась незначительной гибелью клеток до концентрации 1 мкг/мл и последующим экспоненциальным уменьшением выжившей фракции (Elkind е. а., 1969). Следовательно, эта кривая отличается от зависимости, характерной для фибробластов L, имевших повышенную чувствительность к низким 3 35 дозам. Возможно, что отличие является результатом различий в проницаемости для препарата двух типов клеток.
Djordjevic и Kim (1968) изучили гибель клеток в культуре HeLa при действии актиномицина D в течение 6 ч. Препарат в концентрации 10 нг/мл не влиял на величину выжившей фракции, при 50100 нг/мл происходило ее незначительное снижение, а концентрация 300 иг/мл снижала выжившую фракцию до 1. Следовательно, клетки HeLa, как и фибробласты L, оказались нечувствительны к актиномицину D в низких дозах.