Май 2011

Действие 5йод2′дезоксиуридина и 3Нтимидина на культуру клеток L1210 описывалось уравнением Гомпертца (Wilkoff е. а., 1970, 1972). Таким образом, в культуре клеток L1210, как и в лимфоме in vivo (Bruce е. а., 1969), действие антиметаболитов со временем уменьшается.
Изучение действия 3Нтимидина на жизнеспособность клеток L1210 дало важную информацию о закономерностях пролиферации клеток в этой культуре (Wilkoff е. а., 1972). Через 6 ч после добавления 3Нтимидина выжившая фракция составляла 0,1 и, следовательно, 99,9 клеток за это время находились в фазе S и лишь в 0,1 клеток длительность фаз G2, М и Giболее 6 ч. Через сутки выжившая фракция составляла 0,03. Через 46,6 ч после добавления 3Нтимидина все клетки погибали и, следовательно, отсутствовали клетки, в которых Тсts>46,6 ч.

Skipper (1973) приводит внушительный довод в пользу такого метода титрования: излечение наблюдалось при введении именно тех доз препаратов, которые должны были дать такой эффект, судя по кривым дозаэффект. К сожалению, этот довод неприменим для двух наиболее резистентных опухолей: меланомы В16 и опухоли молочных желез пер 4109 49 вых генераций, а именно исследование этих опухолей представляет наибольший интерес для моделирования реакции резистентных солидных опухолей человека. Поэтому остается возможность того, что замедление пролиферации выживших клеток влияет на определение выжившей фракции в этих опухолях. Можно предположить, что при низкой чувствительности опухолей к химиотерапевтическим препаратам сублетальное повреждение было более выражено, чем при высокой чувствительности. При этом сублетально поврежденные клетки, составляющие большую часть выживших клеток, возобновляют пролиферацию после определенного латентного периода. В пользу такого предположения говорит то, что плечо кривой дозаэффект было значительно более выражено у малочувствительных опухолей.

Гибель клеток при действии противоопухолевых препаратов вызывает не только торможение роста и регрессию опухоли, но также и два основных побочных проявления действия этих препаратов поражение кроветворения и тонкого кишечника. Поэтому изучение действия противоопухолевых препаратов на нормальные клетки помогло установить механизмы токсического действия и указало на возможные пути его преодоления.

Дауномицин и адриамицин, два близких по структуре антибиотика, вызывают значительную гибель клеток в культуре. В культуре HeLa выжившая фракция уменьшалась экспоненциально в зависимости от времени инкубации с дауноми. цином (Kim е. а., 1968а). Низкие концентрации антибиотика (10 нг/мл) не вызывали гибели клеток. Таким образом, действие дауномицина, как и актиномицина D, характеризовалось наличием пороговой концентрации. Обращает внимание, что при действии обоих антибиотиков были эффективны даже кратковременные воздействия, что отличает их от различных ингибиторов синтеза ДНК, для которых характерно на 36 личие латентного периода. Клетки HeLa были значительно более чувствительны к летальному действию антибиотиков, чем к такому же действию антиметаболитов.

Основной задачей настоящей монографии является изложение данных о влиянии химиотерапевтических препаратов на размножение и жизнеспособность опухолевых клеток. За последние годы исследования в этом направлении получили бурное развитие и сыграли решающую роль в понимании клеточных механизмов химиотерапии опухолей. Разработка методов количественного определения гибели опухолевых клеток сделала возможным проведение таких исследований. Гибель опухолевых клеток является основным результатом действия всех эффективных в настоящее время противоопухолевых препаратов. Определение зависимости гибели клеток от дозы и времени действия препаратов, фазы клеточного цикла и свойств опухоли привело к пониманию наиболее важных закономерностей противоопухолевого эффекта. Вопрос о механизме противоопухолевого действия является прежде всего вопросом о механизме гибели опухолевых клеток. Поэтому в настоящей работе будут детально рассмотрены основные методы определения выжившей фракции клеток в опухолях, количественного показателя гибели клеток, изложены результаты определения гибели клеток при действии препаратов разных классов в опухолях различного типа. Существенное внимание будет уделено одному из наиболее фундаментальных свойств гибели клеток при действии химио 5 терапевтических препаратов, ее зависимости от фазы клеточного цикла. Гибель опухолевых клеток, определяющая результат лечения опухолей, является следствием действия химиотерапевтических препаратов на основные макромолекулы и биохимические процессы опухолевой клетки. Из многочисленных исследований действия препаратов на биохимические процессы в настоящей работе будут рассмотрены лишь те, в которых устанавливалась их причинная связь с гибелью опухолевых клеток.