11.05.2011

Одинаковая величина выжившей фракции при использовании прямых и косвенных методов титрования и отсутствие возрастания гибели клеток со временем (кроме длительно циркулирующих препаратов) говорят против существования опосредованных механизмов гибели клеток. Гибель опухолевых клеток, очевидно, является результатом прямого действия препаратов.
Характер зависимости гибели клеток от времени действия препарата определяется влиянием трех факторов: фармакокинетикой препарата, распределением времени генерации опухолевых клеток и влиянием препарата на переход клеток из одной фазы цикла в другую. Длительная циркуляция препарата вызывает постепенное уменьшение выжившей фракции после однократного введения. Наличие клеток с удлиненным временем генерации приводит к замедлению гибели клеток при длительном введении препаратов, вызывающих гибель клеток в определенной фазе цикла. Торможение препаратом перехода клеток в чувствительную фазу цикла оказывает аналогичное действие.

Интерес представляет разработка метода колоний для лейкемии L1210, одной из наиболее распространенных экспериментальных моделей (Vadlamudi е. а., 1968). Опухоль, пассировали на мышах CDFb а в качестве реципиентов использовали мышей аллогенной линии BALB/c, титрование на которых давало наилучшие результаты. Вводили внутривенно 104 лейкозных клеток из селезенки или костного мозга в 0,2 мл 6 мышам и определяли число КОЕ в 1 мл исходной взвеси по следующей формуле:

Среди алкилирующих соединений, кроме эмбихина и сернистого иприта, детально изучались в культуре клеток сарколизин, митомицин С и бисрхлорэтилнитрозомочевина. Ogawa с соавторами (1973) показали, что чувствительность различных штаммов миеломы мышей к сарколизину в культуре соответствует эффективности этого препарата in vivo. Так, мыши, привитые штаммом миеломы, для которого D0 in vitro было минимальным, излечивались однократным введением сарколизина. Для другого штамма D0 in vitro было приблизительно в 10 раз больше и лечение мышей с опухолью вызывало лишь значительное увеличение продолжительности 27′ жизни. Это показывает, что интенсивность гибели клеток в культуре является показателем чувствительности для миелом мышей in vivo.

Thatcher и Walker (1969) изучили влияние фазы роста культуры на ее чувствительность к химиотерапевтическим препаратам. Было показано, что чувствительность активно растущей и стационарной культуры клеток хомячка к сернистому иприту, бисрхлорэтилнитрозомочевине и актиномицину D не различается. Индекс метки в культурах составлял 5060 и 1 соответственно. В стационарной культуре клетки задерживались в фазе G2. Авторы считают, что такая культура не моделирует различие в чувствительности быстро и медленно размножающихся клеток, обнаруженное Bruce с соавторами (1966, 1969) для таких препаратов.