Май 2011

Таким образом, изучение гибели клеток в культуре при действии алкилирующих соединений показало, что для большинства препаратов характерно образование сублетальных повреждений, которые проявляются в наличии плеча на кривой дозаэффект и в репарации, обнаруживаемой методом фракционирования доз. Во всех случаях происходило экспоненциальное уменьшение выжившей фракции при возрастании дозы, что приводило к значительной гибели клеток. В ряде случаев была установлена возможность модификации цитотоксического действия при изменении условий среды.

Sakamoto и Elkind (1966) изучали действие эмбихина на фибробласты хомячка, синхронизированные оксимочевиной. Интересной особенностью этой работы является определение зависимости выжившей фракции от дозы в резистентной субпопуляции синхронизированной культуры. Доза 1 мкг/мл, выбранная для изучения зависимости выжившей фракции от фазы цикла, снижала в асинхронной культуре выжившую фракцию до 1. В наиболее чувствительной субпопуляции эта доза снижала выжившую фракцию до 0,1. Зависимость выжившей фракции от дозы в асинхронной культуре и в резистентной субпопуляции (клетки в поздней фазе S) существенно не различалась. В обоих случаях кривая доза эффект имела плечо, кото 60 рое было лишь несколько больше для резистентной субпопуляции, и одинаковый наклон экспоненциальной части кривой.

Исследование зависимости выжившей фракции от фазы цикла привело к фундаментальному выводу: все препараты действуют поразному на клетки в различных фазах цикла. Нет ни одного примера равномерного летального действия на всем протяжении клеточного цикла.
Дифференциальная чувствительность разных фаз клеточного цикла к химиотерапевтическим препаратам имеет значение при исследовании механизма действия препаратов и при разработке оптимальных схем лечения.
Остановимся на зависимости гибели клеток от фазы цикла для химиотерапевтических препаратов разных классов.

Гибель клеток при действии циклофосфамида была изучена в солидной и асцитной формах опухоли Эрлиха. Urano с соавторами (1970) вводили циклофосфамид через 24 ч после перевивки облученным мышам серийных разведений взвеси опухолевых клеток. Кривая дозаэффект состояла из трех компонентов: плечо, начальный экспоненциальный участок, соответствующий чувствительной субпопуляции (D0 11 мг/кг), и заключительный участок, характеризующий резистентную субпопуляцию (D0 33 мг/кг); резистентные клетки составляли 7 популяции. При введении циклофосфамида через 654 ч после перевивки происходило экспоненциальное увеличение выжившей фракции со временем удвоения 8,3 ч. Это отражает быстрое увеличение в популяции числа резистентных клеток.

N колоний в селезенкехМ клеток/мл исходной взвеси NKOE/мл N введенных клеток 10 В контроле 10° млн. клеток содержали 194,5ХЮ3 КОЕ. Метод дает возможность определить число КОЕ на всю селезенку или костный мозг бедра и оценить изменения этого числа после различных воздействий. Этот метод не является высокочувствительным, поскольку для образования одной колонии необходимо введение приблизительно 500 клеток. Действительно, хотя после введения клеток селезенки от лейкозной мыши, леченной циклофосфамидом, колонии не образовывались, у части реципиентов развивался лейкоз.